- Код статьи
- 10.31857/S1027813325010127-1
- DOI
- 10.31857/S1027813325010127
- Тип публикации
- Статья
- Статус публикации
- Опубликовано
- Авторы
- Том/ Выпуск
- Том 42 / Номер выпуска 1
- Страницы
- 149-157
- Аннотация
- Генетически кодируемые флуоресцентные белки широко используются в биологических исследованиях вообще и в нейробиологии в частности. При использовании этих инструментов важно, чтобы экспрессия флуоресцентного белка не нарушала протекание естественных физиологических процессов в клетке. Добавление мотива фарнезилирования к флуоресцентным белкам приводит к их заякориванию в плазматической мембране, что часто используется для визуализации тонких деталей морфологии клетки, например дендритных шипиков. В нашей работе мы исследовали развитие шипиков в первично культивируемых нейронах неокортекса при трансфекции клеток фарнезилированным и немодифицированным EGFP методом электропорации в суспензии в день посадки. Было обнаружено, что нейроны, экспрессирующие фарнезилированный EGFP, демонстрируют выраженные нарушения в развитии шипиков, в частности эти клетки характеризовались более длинными шипиками с большим количеством филоподия-подобных структур, что характерно для различных патологических состояний. Поэтому при использовании фарнезилированных флуоресцентных белков в экспериментах необходимо учитывать их возможное негативное влияние на развитие различных мембранных структур клетки, в частности нейрональных шипиков.
- Ключевые слова
- EGFP трансфекция фарнезилирование нейрон шипик культура нейронов
- Дата публикации
- 04.12.2024
- Год выхода
- 2024
- Всего подписок
- 0
- Всего просмотров
- 5
Библиография
- 1. Day R.N., Davidson M.W. // Chem. Soc. Rev. 2009. V. 38. P. 2887-2921.
- 2. Cranfill P.J., Sell B.R., Baird M.A., Allen J.R., Lavagnino Z., de Gruiter H.M., Kremers G.-J., Davidson M.W., Ustione A., Piston D.W. // Nat. Methods. 2016. V. 13. P. 557-562.
- 3. Cormack B.P., Valdivia R.H., Falkow S. // Gene. 1996. V. 173. P. 33-38.
- 4. Kostyuk A.I., Demidovich A.D., Kotova D.A., Belousov V. V, Bilan D.S. // Int. J. Mol. Sci. 2019. V. 20. P. 4200.
- 5. Craven S.E., El-Husseini A.E., Bredt D.S. // Neuron. 1999. V. 22. P. 497-509.
- 6. Grabrucker A.M., Vaida B., Bockmann J., Boeckers T.M. // J. Neurosci. Methods. 2009. V. 181. P. 227-234.
- 7. Cane M., Maco B., Knott G., Holtmaat A. // J. Neurosci. 2014. V. 34. P. 2075-2086.
- 8. Lim S.T., Antonucci D.E., Scannevin R.H., Trimmer J.S. // Neuron. 2000. V. 25. P. 385-397.
- 9. Kitamura A., Nakayama Y., Kinjo M. // Biochem. Biophys. Res.Commun. 2015. V. 463. P. 401-406.
- 10. Lu J., Wu T., Zhang B., Liu S., Song W., Qiao J., Ruan H. // Cell Commun. Signal. 2021. V. 19. P. 60.
- 11. Амая М., Айзенхабер Б., Айзенхабер Ф., ван Хук М.Л. // Молекулярная биология. 2013. Т. 47. С. 717-730.
- 12. Kim A.K., Wu H.D., Inoue T. // Sci. Rep. England, 2021. V. 11. P. 16421.
- 13. Watts S.D., Suchland K.L., Amara S.G., Ingram S.L. // PLoS One. 2012. V. 7 P. e35373-e35373.
- 14. Rodgers W. // Biotechniques. 2002. V. 32 P. 1044-1051.
- 15. Keiser M.S., Chen Y.H., Davidson B.L. // Curr. Protoc. Mouse Biol. 2018. V. 8. e57
- 16. Yuste R. Dendritic Spines. The MIT Press, 2010.
- 17. Son J., Snng S., Lee S., Chang S., Kim M. // J. Microsc. 2011. V. 241. P. 261-272.
- 18. Hayashi Y., Majewska A.K. // Neuron. 2005. V. 46. P. 529-532.
- 19. Bourne J., Harris K.M. // Curr. Opin. Neurobiol. 2007. V. 17. P. 381-386.
- 20. Fiala J.C., Feinberg M., Popov V., Harris K.M. // J. Neurosci. 1998. V. 18. P. 8900-8911.
- 21. Wisniewski K.E., Segan S.M., Miezejeski C.M., Sersen E.A., Rudelli R.D.// Am. J. Med. Genet. 1991. V. 38. P. 476-480.